培養基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般有碳源、氮源、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養基是提供細胞營養并促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的適宜生存營養環境。所以，在培養基配制好后需要立即滅菌，大限度減少有效營養成分的流失。

培養基種類很多，根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基；根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基；根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、富集培養基、鑒別培養基等；根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、真菌培養基等。

培養基配成后一般需進行性能測試并調節pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養基由于富含營養物質，易被污染或變質。配好后不宜久置，推薦現配現用。

培養基制備過程

1.配料

配方換算→在容器中加入少量蒸餾水→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→溶解煮沸

2.溶解

加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌，推薦老師們使用磁力加熱攪拌器，以防止燒焦并避免操作人員燙傷。

3.調PH

用1mol鹽酸或1mol氫氧化鈉溶液，調節培養基pH值到所適宜的范圍內。

4.過濾

濾紙或棉花進行過濾。（現在以不常見）

5.分裝

一般培養基放在三角瓶、試劑瓶或試管中進行滅菌，待冷卻后使用。有部分特殊培養基，需要滅菌后，靜置冷卻至45-48攝氏度，加入無菌輔料（如脫纖維羊血）。

(1) 液體培養分裝

若作靜置液體培養，則100ml培養基/150ml的三角瓶或125ml旋口瓶。Tuttnauer滅菌器有*的液體滅菌程序，能提高單瓶的有效裝載容積，從而提高培養基的配置數量，以此在培養基性能測試中，為用戶節約更多花費。

三角瓶，否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養，則15-20ml培養基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。

(2) 固體培養基

固體培養基則200ml培養基/250ml的三角瓶或旋口瓶，420ml培養基/500ml旋口瓶，約單瓶的4/5高度；固體斜面培養基一般裝5-6ml，約試管的1/3高度。

6.包扎

分裝好后的三角瓶塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌時溫度不穩定，會造成營養成分被高溫分解，培養基中的碳源、微量氨基酸會使培養基的顏色變深，造成同種培養基不同批次的顏色各不相同。這時培養基性能測試報告該如何完成，廢棄成本高昂，繼續使用影響測試結論怎么辦？用Tuttnauer滅菌器，能為您提供的溫度控制，從根本上解決您的煩惱。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個斜面，約占試管長度的2/3。

9.貯存

固體培養基帶凝固后和液體培養基冷卻至室溫存放于2-8℃冰箱中備用。

10.培養基性能測試

不管什么類型的培養基，都需要進行培養基性能測試。目的有二，一是確保高壓滅菌后的培養基是*無菌的；二是確保培養基營養成分能使細胞或微生物能健康生長。一個完整的培養基性能測試，應該包括陽性生長測試、陰性菌生長測試和無菌性能測試。

培養基配制好后為什么必須立即滅菌？

大家都知道，培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異。為了達到實驗和研究的目的，要按照培養基的配方進行配制。而任何一種培養基制成后應及時*滅菌，以備培養使用。一般培養基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。

發酵過程中，培養基滅菌主要有以下幾個原因：如不滅菌或滅菌不*，會使生物反應的基質或產物，會因環境菌的生長而消耗營養物質，造成生產能力的下降；環境菌會產生代謝產物，這就會特定產物的提取更加困難，造成提純率降低，產品質量下降；環境菌大量繁殖后，會改變反應液的pH值，使反應異常；有些環境菌會分解產物，使生產失敗；如果發生噬菌體污染，生產菌細胞將被裂解，使生產失敗。

培養基滅菌是殺滅培養基中本身的原宿菌群或在空氣中附著的環境菌，更好的讓目標菌生長(減少環境菌消耗培養基中的營養物質，而且有些環境菌生長使會產生抑制目標菌生長的特殊產物)。一般人工培養細胞或細菌，基本上是盡可能讓其生長快速或者產生代謝產物，因此就讓其在適培養基上生長，以縮短培養時間與提高經濟效益。其中，在生產前進行培養基性能測試的意義，直觀的顯現就是避免，生產成本的浪費，簡言之就是以小博大。

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